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      Dark Reader常見問題解答
      2020-12-29 2312 分享到:

      FAQ - Dark Reader Components  Dark Reader組件常見問題

      您是否必須使用琥珀色的眼鏡來保護眼睛?

      眼鏡不是為了保護眼睛。(實際上,請勿將眼鏡與防紫外線裝置一起使用,因為它們不能提供防紫外線的保護?。?/p>

      暗讀取器發出的光是100%可見的藍色。它是明亮的,因此您不應太長時間直接觀看(沒有放置眼鏡或琥珀色的屏幕),就像其他可見光源一樣,但是其中的紫外線為零。眼鏡的功能是光學的-它們可以防止藍色激發光淹沒樣品中微弱的熒光。眼鏡具有與琥珀色屏幕和DR相機濾鏡完全相同的光學特性。當您從凝膠中切出條帶時,該眼鏡特別有用。它們使您免于嘗試在琥珀色屏幕上工作。

      DR46的藍光區域的實際大小與整個盒子的外部尺寸是多少?

      觀察表面為15 x 19厘米。外部尺寸只有18.5 x 22.5厘米,稍大一些。請查看透照器頁面,以了解我們所有單元的更多物理尺寸。

      藍屏對刮擦的抵抗力如何?

      藍屏由塑料制成,比UV屏更容易刮擦。但是,這不是Dark Reader性能的重要因素-我們已經在克隆實驗室中使用Dark Reader幾年了,并且每天都在使用(和濫用)它。盡管在普通實驗室照明下觀看時,藍色表面有些刮擦,但在操作中,除最嚴重的刮擦外,所有其他擦痕都消失了。為了在切割DNA條帶時保護藍屏,可以在凝膠下放置一塊普通玻璃,而不會降低靈敏度。此外,請記住,我們可以以約200美元的價格更換藍屏,而購買新的UV屏則要多花費數百美元。

      還要注意,藍屏比典型的UV屏更具抗沖擊性:將相機放在Dark Reader上,藍屏將保持原樣。(相機上不保證。)

      哪個具有更高的強度,DR46或DR89?

      DR46和DR89(實際上是我們所有的透照器)都具有幾乎相同的光強度。請注意,更強烈的激發并不一定會幫助您檢測更少量的熒光。檢測水平將受到來自樣品的熒光信號與凝膠背景之間的差異的限制,并且無論激發強度如何,該比率都將相同。

      LED可持續使用多長時間?

      我們所有設備使用的LED的額定壽命為50,000小時(每天運行8小時超過17年?。?。


      FAQ - Imaging 成像常見問題

      哪些數碼相機可與Dark Reader配合使用?

      幾乎可以使用任何數碼相機-您的手機可以拍攝出出色的DNA凝膠照片。不過,一般而言,首選手動控制曝光時間,對焦和f-stop的數碼相機。許多研究人員喜歡佳能G系列相機。

      DR89透照儀可以和我們的“ XYZ”成像儀一起使用嗎?

      是的,它會存在:

      有兩個可能的問題:

      –機柜的物理尺寸–對于Dark Reader Transilluminator是否足夠大?

      –機柜的電源。您的成像儀可能使用其他樣式的插頭,因此您可能需要適配器。我們有幾種樣式。

      我們有一臺使用紫外線透照儀的EtBr凝膠相機。我需要一個新的過濾器嗎?

      您應該始終使用深色閱讀器濾鏡–琥珀色屏幕或單獨的DR攝像機濾鏡。該過濾器經過優化,可與Dark Reader配合使用?;镜耐干湔彰髌靼b中包括琥珀色的屏幕。

      為什么我們的照片模糊不清?

      有兩種可能:

      –琥珀色屏幕的下面可能會形成冷凝水。如果凝膠是溫暖的,就會發生這種情況。冷凝水很難直接看到,但會導致照片模糊不清并失去靈敏度。補救措施是使用單獨的DR相機濾鏡,或者簡單地在凝膠上放一塊保鮮膜。

      -您的相機處于“自動”模式。在拍攝熒光DNA凝膠時所涉及的特殊照明條件可能會使自動對焦變得混亂。切換到“手動”模式。

      我想為數碼相機購買Dark Reader相機濾鏡。哪個過濾器適合?

      無論向誰提供相機,都應解決該問題??梢栽趙ww.dpreview.com上找到許多相機的規格。

      您是建議在相機上使用濾鏡還是直接使用琥珀色屏幕?

      琥珀色屏幕和DR攝像機濾鏡的光學特性是相同的,但是通常使用單獨的濾鏡將是一種更靈活的方法。


      FAQ - DNA & Protein Stains  DNA和蛋白染色常見問題

      Dark Reader Transilluminator對DNA檢測有多敏感?

      最常見的染料總結:

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      新的DNA染料的價格是多少?

      新的DNA染色劑的購買價格肯定高于EtBr。但是,重要的是要記住,例如,SYBR Green的敏感性是EtBr的5 -10倍,并且誘變性較低。許多人會認為這些優勢足以抵消額外的成本。

      由于新一代的DNA染色劑通常比EtBr敏感5至10倍,因此可以相應地裝載更少的DN Asize標準品和PCR反應。這樣可以節省大量資金。

      我的凝膠非常薄且脆弱。我可以在Dark Reader的玻璃板上觀看嗎?

      是的你可以。沒問題。因為深色閱讀器燈全是可見的藍色,所以它很容易穿過玻璃和塑料,并且幾乎不損失靈敏度。Dark Reader也可以很好地觀察塑料管,培養皿,96孔板等中的熒光團。

      為什么我的DNA泳道被涂污了?

      DNA太多!許多新污漬的敏感性至少是EtBr的10倍。因此,如果您要加載“正常量”的DNA,您將看到各種各樣的schmutz!將負載在凝膠上的DNA減少5-10倍。

      Dark Reader是否可以與EtBr或GelRed一起使用?

      EtBr和GelRed都是紫外線污漬,在UV盒子上總是看起來更好??梢栽贒ark Reader上看到DNA,但看起來永遠不會很漂亮。為了最大程度地利用EtBr進行觀看,重要的是:

      –在完全黑暗的房間中觀看,并讓您的眼睛稍作調整。

      –使用較少量的EtBr(0.2 – 0.5 ug / mL)

      –加載大量DNA(20+ ng /條帶)


      FAQ - 其他問題

      為什么要擔心紫外線暴露?我在帶有CCD相機的遮光罩內使用了一個紫外線盒。

      您受到很好的保護,但是您的DNA樣本呢?在您調整焦點,固定變焦并設置DNA熟化時間之前。如果您打算將DNA用于進一步的反應,則必須應對大量的DNA損傷。

      我們的研究表明,少于5秒的紫外線暴露時間足以嚴重破壞DNA。另一方面,在黑暗閱讀器上暴露5分鐘不會對DNA造成可測量的損害。(在紫外線盒上放置5分鐘后,DNA斷裂得非常厲害,幾乎無法檢測到。)

      我的熒光團在534 nm處激發。它與Dark Reader兼容嗎?

      激勵的最大值似乎有些長。但是,從整個光譜來看,在500 nm以下有明顯的激發,這就是Dark Reader會“追求”的。四甲基羅丹明(546/576)是具有我們所體驗到的最接近光譜特征的染料,這在Dark Reader中表現出令人驚訝的良好效果(盡管不如熒光素那么好)。如果不確定您的特定應用程序,請給我們發送電子郵件,我們會為您提供適用性建議,甚至安排演示單元供您嘗試!

      DR是否可以與GFP一起使用?

      GFP在395和470 nm處有2個激發峰。470 nm峰被Dark Reader最大激發,當用DR光線照射時,紅移變體(例如EGFP和EYFP)發熒光。另外,DR不會導致GFP暴露于紫外線下而迅速發生光致漂白。使用Dark Reader通常無法實現野生型GFP的可視化。

      深色閱讀器射燈能否用于觀察植物中的EYFP?

      是的,Dark Reader可用于輕松,安全地查看植物,動物和微生物中的熒光蛋白。以下是一些注意事項。

      請記?。耗梢噪S時與我們聯系,在tech_support上討論您的特定實驗設置。

      1.熒光蛋白的類型–諸如EGFP,EYFP,dsRed和mCherry的變體與Dark Reader搭配使用效果很好。野生型GFP沒有。

      2.“背景干擾”的水平。例如,葉綠素將發出熒光,這尤其可以掩蓋紅色熒光信號。

      3. GFP在生物體中的表達水平–很難事先知道它是否足夠高–您可能必須嘗試使用Lamp來觀察。我們通常會

      提供演示燈。請通過演示與我們聯系。

      4.樣品的大小–您的樣品(例如,胚胎和幼苗)在物理上可能太小,以至于肉眼看不到任何熒光。

      我想知道Dark Reader是否可用于熒光TLC板上PAGE凝膠中的寡核苷酸可視化。

      我想我理解這個問題–您想通過PAGE分離寡核苷酸,然后將凝膠放在熒光TLC板上,尋找由寡核苷酸吸收激發光引起的“陰影”。對?

      不幸的是,答案是否定的。寡核苷酸在約260 nm處吸收。黑暗閱讀器發出的光在400-500 nm之間。因此,寡核苷酸將不會吸收Dark Reader激發光,而TLC板將在寡核苷酸后面發出熒光-不會有“陰影”!

      Dark Reader在96孔板上表現如何?

      非常好。由于暗讀器使用的激發光可以穿透大多數塑料和玻璃,因此暗讀器對檢測熒光素(例如96孔板、離心管等)的靈敏度比紫外透光器高8倍。

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